一、豬偽狂犬病毒gB蛋白抗體ELISA檢測試劑盒

通 用 名  豬偽狂犬病毒gB蛋白阻斷ELISA抗體檢測試劑盒

英 文 名  BLocking ELISA Kit for Detection Pseudorabies Virus  gB Antibody 

【主要組分與含量】

【作用與用途】  用于檢測豬血清中偽狂犬病毒抗體。

【注意事項】

（1）實驗前，將試劑盒取出置室溫回溫，至少30分鐘，實驗完成后置2～8℃保存。

（2）若試劑盒陰陽性對照、酶標記物出現少量懸浮物，屬正常現象。

（3）請在試劑盒規定的有效期內使用；禁止非同批試劑盒混用。

（4）沒有用完的抗原包被板應貯存在密封塑料袋內，置2～8℃存放。

（5）避免底物液暴露于強光，避免接觸氧化劑。

（6）濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋，如果發現有結晶加熱使其溶解后再使用。

（7）嚴格按照操作程序，仔細的吸液、計時，充分洗滌，對于獲得精確的結果是非常必要的。

（8）使用樣品稀釋板將所有待檢血清稀釋好，再進行檢測。

【用法與判定】 

1  用法

1.1  樣品準備  取動物全血，4000r/min離心10分鐘，收集上清。或采集血液，待凝固后自然析出血清。血清清亮，無溶血。

1.2  樣品稀釋  在血清稀釋板中，用樣品稀釋液按1:1的比例稀釋待檢血清（例如：120μL樣品稀釋液中加120μL待檢血清）；陰性、陽性對照不稀釋，直接使用。

1.3  洗滌液配制 20倍濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫（20~25℃），然后用蒸餾水或純水作20倍稀釋。

1.4  操作步驟

1.4.1  取抗原包被板（根據樣本多少，可拆開分次使用），每孔加入稀釋好的洗滌液300µL，不必靜置，棄掉孔中洗滌液，洗滌2次，最后一次拍干。每孔加入稀釋好的樣本100μL；另外設陽性對照、陰性對照各2孔，100μL/孔。置37℃孵育60分鐘。

1.4.2  棄去板中液體，每孔加入稀釋好的洗滌液250µL，棄掉孔中洗滌液，重復洗滌共計洗板5次，拍干。

1.4.3  每孔加入100μL酶標記物，輕微振蕩混勻。置37℃下孵育30分鐘。

1.4.4  棄去板中液體，洗滌5次，方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加底物顯色液100µL，室溫（20~25℃）避光顯色10分鐘。

1.4.6  每孔加終止液50µL。10分鐘內用酶標儀測定并記錄各孔在450nm波長處的吸光度（OD）值。

2  判定

2.1  成立條件   試驗成立條件是陰性對照的OD_450nm平均值≥0.6，陽性對照的OD_450nm平均值≤0.5。

2.2  判定標準  S為樣品孔OD_450nm值，N為陰性對照OD_450nm平均值。如果S/N≤0.6判為陽性。如果0.6＜S/N≤0.7判為可疑。如果S/N＞0.7判為陰性。

【規格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【貯藏與有效期】  2~8℃保存，有效期為12個月。

溫馨提示：抗原包被板真空包裝袋若有漏氣，抗原包被板仍然正常有效， 不影響實驗結果，請放心使用。                        

    僅供科研使用

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